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人沙眼衣原體抗體IgG(CT-IgG)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書 定量

[商品編號]:H-12188

[CAS]:

[英文名稱]:

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:上海恒遠

[會員價格]:登陸后查看 [庫  存]: 暫時缺貨!

[數  量]:

產品描述

人沙眼衣原體抗體抗體IgG(CT-IgG)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。
規格:96T/48T
檢測范圍:                                                              
1.5 ng/L -40 ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中沙眼衣原體抗體抗體IgG(CT-IgG)含量
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中沙眼衣原體抗體抗體IgG(CT-IgG)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入沙眼衣原體抗體抗體IgG(CT-IgG),再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的沙眼衣原體抗體抗體IgG(CT-IgG)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中沙眼衣原體抗體抗體IgG(CT-IgG)濃度。
試劑盒組成

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標試劑
6ml×1瓶
8
標準品(80 ng/L)
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
9
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張  
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個

標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

40 ng/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
20 ng/L
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 ng/L
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
5 ng/L
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5 ng/L
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 
 
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
操作程序總結:
 
 
計算
  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
 
  • 文檔名稱

    文檔類型

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  • 小鼠酮體(KB)ELISA試劑盒說明書

    (pdf)

    201 KB

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